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      PCR儀的分類有這些
      發布時間:2020-03-18   點擊次數:539次
         PCR儀的分類有這些
        PCR儀主要應用于科研、教學、臨床醫學、檢驗、檢疫等。為了讓大家更好地了解PCR儀,下面我們來說說其分類及其作用。
        1.梯度PCR儀
        儀器多應用于科研、教學機構。
        一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNApian段其較適合的退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的較適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣既節約時間,也節約經費。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。
        2.實時熒光定量PCR儀
        在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發和采集系統和計算機分析處理系統,形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同,在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統,得出量化的實時結果輸出。
        熒光定量PCR儀有單通道,雙通道和多通道之分。當只用一種熒光探針標記的時候,選用單通道;有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,實現一次檢測多種目的基因的功能。
        實時熒光定量PCR儀主要應用于臨床醫學檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等。
        3.原位PCR儀
       ?。ㄓ行┢放频腜CR儀具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通過替換模塊進行多用途開展實驗工作)
        是用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀。如病原基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等??杀3旨毎蚪M織的完整性,使PCR反應體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在的位置進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA,還能標出靶序列在細胞內的位置。于分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有著重大的實用價值。
        PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類。利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈,進而達到基因復制的目的。
        使用的PCR儀能在模塊之間準確到達設定的溫度并具有一致性十分關鍵。確保熱準確性的一種方法就是經常使用溫度驗證試劑盒進行檢測并根據需要由接受過培訓的專業人士進行重新校準。溫度驗證檢測通??捎糜冢?/div>
        在等溫模式下相對于設定溫度的孔間準確性
        在溫度轉換后相對于設定溫度的孔間準確性
        熱蓋溫度的準確性(可影響模塊和樣品溫度)
        以上關于PCR儀的介紹就到這里了,希望對你有所幫助。
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